产品货号：
KD1962
中文名称：
EB缓冲液(除菌)—猪链球菌感受态制备试剂
英文名称：
EB buffer
产品规格：
100mL|500mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
询价
保存：2～8℃
操作步骤(以SC-19为例，仅供参考)：
(一)感受态细胞的制备：
1.挑猪链球菌2型菌SC-19单菌落于10mL加5%牛血清的TSB中，37℃摇床培养过夜。
2.以1:100的比例转接于TSB培养基中，37℃摇菌2-3h，使菌液处于对数生长期(OD600约为0.3-0.5)。
3.6000rmp/min离心1min。弃上清。以100mL菌液为例。
4.用10mL的CTB重悬菌液，轻柔混匀，4℃ 6000rmp/min离心1min，弃上清，用10mL的CTB重悬，冰浴30min。
5.4℃ 6000rmp/min离心1min，弃上清，用10mL的EB(EBS) buffer洗两次。
6.离心弃上清，用500μL的EB甘油缓冲液(EB缓冲液加15%的甘油)重悬菌体沉淀，按100μL分装。
(二)转化：
1.在100μL感受态细胞中，加入质粒混匀，加入电转杯中，电击。
2.电击后，加入500μL的在37℃预热的含胎牛血清的TSB中，37℃摇床孵育2h。
3.将菌液涂布于相应的抗性筛选的TSA平板，28℃培养24-32h，得到含有穿梭质粒的链球菌单菌落。
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